采用外周血或抽取一定量的胸水、腹水，即可诊断结核病。T细胞斑点（T-SPOT）实验的出现，为早期发现结核病带来了希望。传统的结核病诊断方法多为痰抗菌涂片、结核菌素试验和结核抗体试验。这些方法的灵敏性和特异性较差。结核分枝杆菌培养作为诊断结核的“金标准”，特异性虽高但敏感性低，并且培养周期长，因此急需寻求一种快速、准确判断人体是否感染结核杆菌的检测方法。 

　　T-SPOT实验结合了酶联免疫斑点技术（即ELISPOT技术）与γ-干扰素释放试验，通过检测受结核分枝杆菌抗原刺激而活化的效应T细胞来诊断结核菌感染。结核菌感染后体内长期存在抗原特异性T细胞，当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释放γ-干扰素。实验中利用ESAT6和CFP10两种结核特异性抗原刺激外周血中结核特异性T淋巴细胞分泌γ-干扰素，通过ELISPOT方法检测γ-干扰素的释放水平（即斑点的多少），从而判断机体是否感染了结核杆菌。ESAT6和CFP10均来自结核分枝杆菌基因组RD1区域，且仅结核分枝杆菌复合群存在RD1区，所有的卡介苗和大多数环境分枝杆菌均缺失该区域。 

　　该检测不受卡介苗接种、环境分枝杆菌感染的影响，特异性强，是目前早期发现结核病最有效的检测手段。最重要的是，其可用于儿童肺结核的辅助诊断，因为某些儿童肺结核患儿干咳不排痰，用传统方法几乎无法诊断，T-SPOT实验解决了这一问题。